PALM
(FPALM, Photo-activated localization microscopy, fotoaktivált lokalizációs mikroszkópia)
A szuperrezolúciós mikroszkópia egyik alkalmazása.
A diffrakciós limitnél nagyobb felbontást biztosító, letapogató fluoreszcens mikroszkópiai eljárás.
Alapelve véletlenszerűen aktivált festékmolekulák lokalizálása. Egy egyedi molekula pozíciója nanométeres (vagy jobb) pontossággal lokalizálható, ha megfelelő mennyiségű fotont emittál, és a molekula 200 nanométeres körzetében nincs hasonlóan emittáló molekula.
Az eljárás elve az ábrákon látható: a baloldali ábrán a leképezendő objektum, a középső ábrán a lokalizált pontok egy része, a jobboldali ábrán a vágeredmény.
A koncepció alapján kis erejű aktivációs lézerrel való gerjesztéssel a molekulák kis hányada véletlenszerűen bekapcsol, ezeket ábrázolják, lokalizálják, kifakítják (bleaching).
A kiolvasó lézer detektálja és rögzíti a fluoreszcens molekulák pozícióját a megvilágított területen belül.
Függvényillesztéssel képük alapján meghatározhatók az egyes festékmolekulák pozíciói (a fényes pontok centrumát határozzák meg).
A kiolvasás addig történik, amíg a molekulák fluoreszcens állapotban vannak.
Újabb molekulákat aktiválnak, megismétlik az előbbi procedúrát.
Ezt a módszert akár több 1000-megismételve a minta képe rekonstruálható az egyes festékmolekulák pozíciói alapján.